化妆品毒理学安全评价 武汉化妆品检测机构-j9九游国际真人

根据《化妆品安全技术规范》中的zui新规定，微核试验主要是用来评价化妆品的致突变性能的检测。微核试验检测的目的很明确，就是用来检测化妆品可能对人体细胞遗传毒性造成的损伤。由于减少、优化、替代、禁止动物试验的观念，逐渐在国际社会取得共识。类似欧盟的法规中都明确规定，禁止化妆品原料进行动物试验。wto双边协议也禁售用动物试验检测的化妆品原料及成品。所以微核试验就成为替代动物试验的首先体外试验方法。

体外微核试验多采用哺乳动物细胞，而哺乳动物细胞为有核细胞，在我国有核细胞微核的判定标准很少， 可借鉴的标准有《食品安全性毒理学评价程序》和《新药临床前安全性评价与实践》，不过这两种判定标准均是基于骨髓细胞微核试验，骨髓细胞微核试验采用的又是嗜多染红细胞，无核，微核明显。当然有关体外微核试验的参考标准也有，比如gb/t 28646-2012《化学品 体外哺乳动物细胞微核试验方法》。这些标准都是帮助我们研究化妆品体外微核试验的好资料。

那么国家对化妆品微核试验有没有明文规定？当然有，而且是5月1号刚刚实施的药监局2021年17号文件。该文件对《化妆品安全技术规范》进行了修订。《体外哺乳动物细胞微核试验》便是新增的毒理学试验项目，当然也是必做项目。该试验方法相较于传统的体内哺乳动物骨髓细胞微核试验方法，能更稳定、方便、快速的检测化妆品的遗传毒性，。 所选用的细胞株及实验体系简便也易行，具有较强的可操作性。

作为化妆品重要的毒性安全评价试验，微核试验不仅是化妆品，尤其是新原料的必做项目，在农药、新药、食品添加剂、化学品等等方面也都是必做试验之一。盖其原因无外是微核试验具有操作方式简便、快速，性质敏感、特异，检测准确、经济等诸多优点，所有很多国家和国际组织也会用它作为检测环境中致突变剂的快速初筛试验。微核试验分为体内研究和体外研究。体内不如动物骨髓细胞微核试验多采用敏感动物。动物饲养要求资金投入大，环境、喂养也极为严格，而且外推到人体不确定性因素也有很多，故而体外微核试验技术得到人们不断的改进和完善，逐渐成为致突变性能的主流检测方法。

化妆品《体外哺乳动物细胞微核试验》适用于检测有丝分裂细胞暴露于受试物期间或之后致染色体断裂，或诱发非整倍体的能力。如果短期（3 h～6 h）处理的试验结果为阴性或不明确时，需要进行无代谢活化系统的长期处理试验（用受试物处理细胞1.5～2.0个正常细胞周期）。试验分为使用和不使用肌动蛋白聚合抑制剂细胞松弛素b（cytochalasinb，cytob）两种方法。

方法一：在细胞经过受试物处理，有丝分裂前使用cytob，然后观察分析已完成一次有丝分裂的细胞（双核细胞）微核率。

方法二：不使用cytob，细胞经过受试物处理后观察分析细胞微核率。

当选用人类淋巴细胞时，建议采用方法一，因为不同来源的细胞周期不同，而且不是所有的细胞都对植物血球凝集素（pha）有反应。如果有证据表明受试物干扰cytob的活性，或cytob可能影响细胞的生长（如小鼠淋巴瘤细胞株），建议采用方法二。